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人肝動脈平滑肌細胞

【概要描述】人肝動脈平滑肌細胞公司正在出售的產品:U-2 OS人成骨肉瘤細胞人肺癌細胞/5Fu耐藥株A549-5Fu(STR鑒定正確)人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2(STR鑒定正確)人乳腺癌細胞MDA-MB-436(STR鑒定正確)人乳腺癌耐藥細胞株MCF-7+adr (STR鑒定正確)人卵巢癌細胞Anglne (STR鑒定正確)人乳腺導管癌細胞帶熒光酶BT474+LUC (STR鑒定正確)人腎透明細胞癌細胞

型號: 點擊量:661 廠商性質:代理商 更新日期:2025-03-18
產品詳情

本公司所有產品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!
人肝動脈平滑肌細胞

產品名稱

人肝動脈平滑肌細胞

組織來源

肝動脈組織

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

包裝

T25培養瓶

貨號

GOY-01X0860

細胞形態

成纖維細胞樣


人肝動脈平滑肌細胞

人肝動脈平滑肌分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別肝臟的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈肝臟的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素,最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,并且與血管疾病的發展及穩定性有關。
方法簡介:

公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌采用yi蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:

公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 


人肝動脈平滑肌細胞

人肝動脈平滑肌細胞

培養基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

人肝動脈平滑肌細胞

準備工作

1. 實驗器材準備:準備無菌的培養皿、培養瓶、移液管、離心管、手術器械等,并進行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準備:配制或購買合適的培養基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內。

3. 實驗動物或組織來源準備:根據實驗需求,選擇合適的動物并進行相應的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預冷的無菌PBS沖洗數次,以去除血液和雜質。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續消化。

細胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫搖床或培養箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當組織塊大部分被消化成單細胞懸液或小細胞團時,加入含血清的培養基終止消化。

3. 過濾與離心:用細胞篩過濾細胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當的轉速離心,收集細胞沉淀。

細胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細胞的形態、生長狀態、密度等,記錄細胞的變化情況,如發現細胞污染或異常,及時采取相應措施。
2. 細胞計數與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍染色等方法對細胞進行計數和活力檢測,以了解細胞的生長情況和健康狀態。

人肝動脈平滑肌細胞

人肝動脈平滑肌細胞

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人肝動脈平滑肌細胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養環境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質。

2. 消化酶選擇

- 根據組織類型選擇消化酶,避免過度消化導致細胞損傷。

- 消化時間需嚴格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細胞解離狀態。

二、培養條件優化

1. 培養基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養基品牌或批次,減少細胞適應壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細胞。

四、狀態監控

1. 日常觀察

- 每天檢查細胞形態、密度及培養基顏色,及時更換培養基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(如細胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細胞分裂次數有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或專用凍存培養基),梯度降溫后液氮保存。


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