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大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

【概要描述】大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:NCI-H647非小細胞肺癌兔胃黏膜上皮細胞兔胃平滑肌細胞兔胃成纖維細胞兔小腸平滑肌細胞兔小腸隱窩上皮細胞兔小腸成纖維細胞兔結(jié)腸粘膜上皮細胞兔結(jié)腸平滑肌細胞兔結(jié)腸成纖維細胞

型號: 點擊量:650 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-19
產(chǎn)品詳情

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品名稱

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

組織來源

視網(wǎng)膜組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1049

細胞形態(tài)

內(nèi)皮細胞樣


大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細胞具有不同的特性,在腦和視網(wǎng)膜中,這些內(nèi)皮細胞具有內(nèi)屏障的功能,在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。
方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-中性dan白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 


大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

準備工作

1. 實驗器材準備:準備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實驗動物或組織來源準備:根據(jù)實驗需求,選擇合適的動物并進行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫搖床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細胞懸液或小細胞團時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細胞篩過濾細胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細胞沉淀。

細胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細胞計數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍染色等方法對細胞進行計數(shù)和活力檢測,以了解細胞的生長情況和健康狀態(tài)。

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

乙型肝炎病毒全基因組轉(zhuǎn)基因人肝細胞系;HL02-H1

雜交瘤細胞株;H3N2-CIV-HA-2C5

雜交瘤細胞株;A135

廣金錢草對照藥材

雜交瘤細胞株;AFM1/3D8

桂皮對照藥材

雜交瘤細胞株;AFB1/3B9

龜甲對照藥材

人支氣管細胞系;HBE-TT

桂枝對照藥材

人臍靜脈內(nèi)皮細胞系;HUVEC-T/T

廣山藥對照藥材

雜交瘤細胞株;XX

海風(fēng)藤對照藥材

人肝癌細胞;Huh-7

海浮石對照藥材

人喉癌細胞;Hep-2NS2

廣藿香對照藥材

雜交瘤細胞株;1E8H3

廣東紫珠對照藥材

狗腎細胞;MDCKNS1

廣東土牛膝對照藥材

豬睪丸細胞懸浮適應(yīng)株;ST-2014S

廣東海風(fēng)藤對照藥材

雜交瘤細胞株;9H3

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞關(guān)防風(fēng)對照藥材

雜交瘤細胞株;4G5

瓜蔞子對照藥材

D159687

瓜蔞皮對照藥材


大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細胞損傷。

- 消化時間需嚴格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。





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