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大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

【概要描述】大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:NCI-H2172非小細(xì)胞肺癌小鼠小腸成纖維細(xì)胞小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞小鼠膽囊上皮細(xì)胞小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞小鼠肝星狀細(xì)胞

型號(hào): 點(diǎn)擊量:689 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-19
產(chǎn)品詳情

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

組織來(lái)源

皮膚組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X1003

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣


大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

大鼠表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,此類細(xì)胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,細(xì)胞核與細(xì)胞器wan全消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對(duì)機(jī)體尚有保護(hù)作用,故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,使其過(guò)早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞最終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過(guò)程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見(jiàn)到透明層。
方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無(wú)菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購(gòu)買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無(wú)菌且在有效期內(nèi)。

3. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或組織來(lái)源準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,選擇合適的動(dòng)物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫(kù)中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無(wú)菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對(duì)組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無(wú)菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時(shí)間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時(shí),加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過(guò)濾與離心:用細(xì)胞篩過(guò)濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測(cè)

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時(shí)采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)與活力檢測(cè):在需要時(shí),可采用臺(tái)盼藍(lán)染色等方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和活力檢測(cè),以了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況和健康狀態(tài)。

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫或非營(yíng)養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無(wú)菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時(shí)密度建議控制在 70%-80%,過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無(wú)菌操作

- 全程在超凈臺(tái)操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長(zhǎng)期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測(cè)

- 定期檢測(cè)支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時(shí)丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時(shí)更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營(yíng)養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時(shí)凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

抗抗人垂體泌乳7

抗呼吸道合胞病毒單克隆抗體7株

CEA小鼠雜交瘤

抗染色試劑盒(改良Kinyoun冷染法)

CEA小鼠7

抗染色試劑盒(Ziehl-Neelsen熱染法)

雜交瘤細(xì)胞抗CD2

D’Autoni碘液

雜交瘤(抗CD3)

新型隱球菌染色試劑盒

雜交瘤細(xì)胞抗AChE

Conn改良Weigert革蘭染色試劑盒

1D14A2A10

蘇丹黑B染色試劑盒(細(xì)胞專用)

人胰腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株

蘇丹黑B染色試劑盒

AVND-3C8

抗染色試劑盒(金胺O法)

WL-3C2

布氏桿菌染色試劑盒

AMVP

Kovac試劑

Z1A5

幽門螺旋桿菌染色液(亞甲法)

H2H5

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞螺旋體菌銀染試劑盒(Warthin-Starry法)

S-163-6

幽門螺旋桿菌染色試劑盒(MGG法)

二氫白屈菜紅堿

乙型肝炎病毒染色試劑盒(Shikata地衣紅法)







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