使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉錄）反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
?產品名稱：脲原體通用PCR檢測試劑盒供應商
英文名稱：Ureaplasma spp.PCR
規格：詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸：低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途：生化實驗，合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑：樣品 RNA。
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性能指標：點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項：
①加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?5-溴戊 2067-33-6 50次 T7 in vitro Transcription Kit -20℃保存
長春新堿 2068-78-2 50次 T7 in vitro Transcription Kit -20℃保存
-基-4-哌啶甲醇 2069-89-8 50次 SP6 in vitro Transcription Kit -20℃保存
雙二苯基膦甲烷 207-20-7 50次 SP7 in vitro Transcription Kit -20℃保存
D-半胱氨鹽鹽單水合物. 2072-46-8 50次 T3 in vitro Transcription Kit -20℃保存
(R)-4-甲氧基扁桃 2074-89-0 50次 T3 in vitro Transcription Kit -20℃保存
,8-雙二甲氨基萘 20734-58- 25OD RNA Cap Structure Analogs -20℃保存
2-氨基-6-溴苯甲 20776-48- 25OD RNA Cap Structure Analogs -20℃保存
2-氨基-3-溴苯甲 20776-5-6 25OD RNA Cap Structure Analogs -20℃保存
2-氨基-5-氯-3-基甲 20776-67-4 25OD RNA Cap Structure Analogs -20℃保存
(R)-環氧苯乙烷 20780-53-4 25OD RNA Cap Structure Analogs -20℃保存
(S)-環氧苯乙烷 20780-54-5 0.5mL NTP Solution，0 mM -20℃保存
TCFH四基氯代脲六氟磷酯 20795-99-9 0.25mL ATP Solution -20℃保存
4-氯-3-硝基肉桂 20797-48-2 2mL
四氫吡喃-4-醇 208-44-9 0.25mL UTP Solution -20℃保存
脲原體通用PCR檢測試劑盒供應商月桂乙酯 規格:g Peanut Oil (AS)
正辛乙酯 規格:5g
油乙酯 規格:0mg Nateglinide Related Compound A
硬脂乙酯 規格:200mg L-Cysteine Hydrochloride
對甲苯乙酯 規格:00mg Aspartic Acid
三乙甘油酯 規格:250mg Liothyronine
油甘油酯 規格:200mg Pentoxifylline
三油甘油酯 規格:g Sodium Citrate (AS)
乙正辛酯 規格:g Potassium Citrate (AS)
聚（，4-丁二醇丁二）酯 規格:500mg Nicotine Bitartrate Dihydrate
聚乙烯乙酯 規格:g Bismuth Subcarbonate (AS)
丙二醇酯 規格:200mg Proparacaine Hydrochloride
肉豆蔻異丙酯 規格:50mg Ecamsule Related Compound D
丙正丙酯 規格:50mg
硼三正丁酯 規格:25mg
